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在日常操作過程中，安全柜內部應分為3個區(qū)，依次為潔凈區(qū)、工作區(qū)、污染區(qū)。潔凈區(qū)用于擺放吸頭盒、培養(yǎng)基等必要物品；工作區(qū)用于無菌操作；廢棄吸頭等棄于位于污染區(qū)的垃圾盒內。
2、注意進氣格柵
安全柜的進氣格柵通常位于操作臺前方，在操作時應盡量避免衣袖遮擋進氣格柵干擾安全柜的安全氣流，從而帶來安全隱患。如圖2所示：左邊是非正確操作-----操作人員手臂和實驗物品擋住了格柵；右邊為正確操作-----安全柜擱手架高于操作臺面，操作人員手臂避免了遮擋進氣格柵。
3、勿放置過多物品
安全柜的操作臺除了前面有進氣格柵，后面也有格柵。如果在操作過程中放置的物品遮擋住后格柵，也會影響安全氣流，給操作帶來安全隱患。
4、保持操作臺面下方清潔
建議定期將安全柜操作臺面提起，清理臺面下方區(qū)域，保持該區(qū)域清潔。如圖4 所示為非正確操作-----臺面下方的污物易造成樣品污染。
5、正確使用紫外燈
紫外燈殺菌的特點是快速、方便、易遮擋。因此，在使用紫外燈照射工作臺時應保證內部干凈無遮擋物品。
6、安全柜內勿使用酒精燈
正規(guī)合格的安全柜無需酒精燈即可進行無菌操作。點燃酒精燈還有可能干擾安全柜內的安全氣流，使用不當還可能造成核心部件如超高效過濾器損壞，因此不建議在安全柜內使用酒精燈。
7、超凈工作臺≠生物安全柜
超凈工作臺不等同于生物安全柜，超凈工作臺只保護工作區(qū)的樣品免受外來污染，適用于需要局部潔凈無菌工作環(huán)境的試驗操作。生物安全柜可以為人員，樣品提供雙重保護，是一種能防止實驗操作處理過程中含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的安全防護設備。
8、進行特殊材料操作的注意事項
在處理特殊材料操作，例如，有毒，易燃，易爆等材料之前，應當由專業(yè)的生物安全專員或工程師來確定生物安全柜是否適用于您的應用需求。
9、正確選擇生物安全柜的放置地點
安全柜應當盡量遠離外部氣流干擾因素，例如門窗、空調通風口、人員過道以及其他實驗室氣流干擾設備（如同房間的其他生物安全柜、通風櫥或者超凈工作臺等）。
10、安全柜警報響起時請勿繼續(xù)操作
當安全柜的警報系統(tǒng)觸發(fā)時，請立即停止手上的工作，并聯(lián)系專業(yè)的工程師。
11、 請勿在生物安全柜內擺放過多物品
安全柜的工作區(qū)域內嚴禁堆積過多的物品，以免影響安全柜本身的氣流和安全性能。
12、避免對氣流屏障的干擾
請遵循緩慢移動原則，操作時手臂應盡量水平緩慢移動，以避免影響正常的氣流狀態(tài)。避免垂直和過快移動造成污染物外泄。
13、安全柜自凈周期
開啟安全柜時，讓安全柜先自主運行3-15分鐘，來達到氣流的穩(wěn)定和凈化操作區(qū)的空氣以達到相應的潔凈度級別。然后操作者再進行相關的實驗操作即可。
14、正確的生物安全柜工作高度
請確保安全柜在工作時前窗處于規(guī)定的安全高度。
15、在安全區(qū)域內進行操作
切勿阻塞安全柜前窗處的進氣格柵和工作腔內的空氣回流孔。盡量在工作區(qū)的中心部位進行操作。
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